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| 產(chǎn)地 | 國(guó)產(chǎn) |
| 保存條件 | 詳見說(shuō)明書 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BK-XB1930 |
| 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
| 組織來(lái)源 | 腎組織 |
| 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
| 是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
| 保質(zhì)期 | 詳見說(shuō)明書 |
| 器官來(lái)源 | 小鼠源 |
| 免疫類型 | 詳見說(shuō)明書 |
| 品系 | 原代細(xì)胞 |
| 生長(zhǎng)狀態(tài) | 貼壁 |
| 物種來(lái)源 | 小鼠源 |
| 包裝規(guī)格 | T-25*1瓶 |
| 是否進(jìn)口 | 否 |
基本信息：
細(xì)胞概述
- 定義：小鼠原代腎足突細(xì)胞是從小鼠組織中分離得到的，未經(jīng)傳代培養(yǎng)或僅經(jīng)過(guò)少數(shù)幾次傳代的細(xì)胞，保持了細(xì)胞在體內(nèi)的原始特性。
- 來(lái)源：主要來(lái)自小鼠的腎組織，通常選取2-3月齡、體重18-22g的BALB/c小鼠等合適品系的小鼠作為細(xì)胞供體。
- 重要性：足細(xì)胞連同腎小球基底膜和皮一起構(gòu)成了腎小球血液濾過(guò)屏障，對(duì)于維持機(jī)體正常的功能和內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定至關(guān)重要。
細(xì)胞特性
- 形態(tài)特征：呈星型多突狀，胞體較大，由胞體伸出許多突起，又稱足突，呈指狀交叉覆蓋于腎小球基底膜外表面。
- 生長(zhǎng)特性：屬于貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞，需要附著在合適的基質(zhì)表面才能生長(zhǎng)和增殖。
- 功能特性：正常情況下可分泌腎小球基底膜的主要組成成分，如IV型膠原和纖維連接蛋白；在促腎纖維化等刺激下，能分泌具有降解腎小球基底膜作用的基質(zhì)金屬蛋白酶和組織蛋白酶，參與腎小球基底膜的代謝平衡。
分離與培養(yǎng)
- 分離方法：常用機(jī)械研磨過(guò)不同孔徑不銹鋼網(wǎng)篩結(jié)合膠原酶消化法，或單純酶解法。先將小鼠處死，取出，剪取腎皮質(zhì)部，經(jīng)研磨、過(guò)濾、消化等步驟，獲得腎小球，再進(jìn)一步處理得到腎足突細(xì)胞。
- 培養(yǎng)條件：一般使用F-12等培養(yǎng)基，添加5%馬血清、2.5%胎牛血清、胰島素、氫化可的松、轉(zhuǎn)鐵蛋白等成分，在37℃、5%CO?的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
鑒定方法
- 形態(tài)學(xué)觀察：通過(guò)光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)特征，如星型多突狀、足突的指狀交叉等。
- 免疫學(xué)鑒定：采用免疫熒光或免疫組化方法，檢測(cè)細(xì)胞特異性標(biāo)記物，如Podocin、WT-1等，若呈陽(yáng)性則表明為腎足突細(xì)胞。
| 產(chǎn)品名稱 | 小鼠原代腎足突細(xì)胞價(jià)格 | 組織來(lái)源 | 腎組織 |
| 種屬 | 小鼠源 | 傳代次數(shù) | 不建議傳代 |
| 運(yùn)輸 | 常溫 | 貨號(hào) | BK-XB1930 |
產(chǎn)品名稱 小鼠腎足突細(xì)胞
組織來(lái)源 腎組織
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
方法簡(jiǎn)介 公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎足突采用機(jī)械研磨過(guò)不同孔徑不銹鋼網(wǎng)篩結(jié)合膠原酶消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè) 公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎足突經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
注意事項(xiàng)：
該細(xì)胞只可用于科研。出現(xiàn)以下情況不予以重發(fā)：客戶造成細(xì)胞污染；客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好；細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片；細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理；細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知相關(guān)情況。 小鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 小鼠原代皮膚成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基 小鼠腸粘膜上皮細(xì)胞 MOLM-13 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 小鼠腎小管上皮細(xì)胞 SNU-182 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 小鼠腎小球系膜細(xì)胞 CT26 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 小鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞 NCI-H460 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 小鼠腎足細(xì)胞 UMR-106 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 小鼠輸尿管上皮細(xì)胞 小鼠原代腎足突細(xì)胞價(jià)格AMO-1 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 小鼠輸尿管平滑肌細(xì)胞 MOLT-4 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 小鼠膀胱上皮細(xì)胞 HS578T 細(xì)胞專用培養(yǎng)基
公司出售的產(chǎn)品：
細(xì)胞操作步驟:
傳代步驟：
棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1 - 2次。
加2ml消化液（0.25% Trypsin - 0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 - 2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
按6 - 8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1 - 2mL培養(yǎng)液后吹勻。
將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
復(fù)蘇步驟：
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1 - 2mL培養(yǎng)基后吹勻。換液并檢查細(xì)胞密度。
凍存步驟：
以T25瓶為例：
細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1 - 2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
1000RPM離心5分鐘去掉上清，用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
將凍存管置于程序降溫盒中，放入 - 80℃冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存，記錄凍存管位置以便下次拿取。
